植物台盼蓝染色实验步骤(台盼蓝染色的操作方法 以及使用范围 优点)

逄骅羽
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大家好,乐天来为大家解答以下的问题,关于植物台盼蓝染色实验步骤,台盼蓝染色的操作方法 以及使用范围 优点这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、基本性质  中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝  分子式:C34H24N6O14S4Na4  分子量: 960.82  可溶于水(10mg/ml)  是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。

2、还常用于细胞是否存活。

3、活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

4、机理  正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

5、通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。

6、因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。

7、台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

8、注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

9、  台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

10、  台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

11、步骤      步骤:(来自supergama)  4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。

12、使用时。

13、用PBS稀释至0.4%。

14、(也可买Gibco的成品); T$ d& ! h% l, E) Z) A- W  2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

15、  3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

16、(终浓度0.04%)  4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

17、 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _  5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

18、  6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%其他  保存条件  室温保存  说明  有潜在致癌危险  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

本文分享完毕,希望对大家有所帮助。

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